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各種組織特殊染色法—網(wǎng)狀纖維染色

來源:印染在線 發(fā)布時(shí)間:2008年09月01日

各種組織特殊染色法—網(wǎng)狀纖維染色

網(wǎng)狀纖維是一種纖細(xì)的纖維。它沿著網(wǎng)狀細(xì)胞和突起分支,并互相交織成網(wǎng),因而被稱為網(wǎng)狀纖維,又因這種纖維對(duì)銀的浸染著色特別顯著。故又稱為嗜銀纖維。它主要由III型膠原蛋白構(gòu)成,也具有642nm周期性橫紋.它主要分布于骨髓、脾、淋巴結(jié)、肝和肺等臟器。癌組織中間未見有網(wǎng)狀纖維,但在其邊緣可見有大量的網(wǎng)狀纖維,但在其邊緣可見有大量的網(wǎng)狀纖維圍繞,俗稱癌巢。 ⑴網(wǎng)狀纖維的形成 它的形成主要是在纖維母細(xì)胞的粗面內(nèi)漿網(wǎng)中,合成可溶性膠原。在醛糖、類脂的作用下,形成可溶性膠原,隨后它被分泌到細(xì)胞外,在基質(zhì)中(或在細(xì)胞的表面)通過原膠原蛋白分子間的交聯(lián),聚合成為不溶性的膠原原纖維即網(wǎng)狀纖維。 ⑵網(wǎng)狀纖維在組織化學(xué)上的反應(yīng) 網(wǎng)狀纖維的主要成分是網(wǎng)硬蛋白,在組織化學(xué)上,網(wǎng)狀纖維和膠原纖維是容易區(qū)別的。網(wǎng)狀纖維是分支纖細(xì)的纖維。Van Gieson 氏染色不顯色或微紅色。PAS反應(yīng)呈現(xiàn)紅紫色,銀浸染為黑色。膠原纖維用Van Gieson氏染色為紅色,PAS反應(yīng)呈微粉紅色。銀浸染為黃色或棕黃色。 ⑶狀纖維的顯示 ①染色染料技術(shù):從網(wǎng)狀纖維的顯示,區(qū)別和效果等方面,這種技術(shù)被認(rèn)為是不可靠的,其原因是它只能跟膠原纖維區(qū)別開來。 ②金屬浸染技術(shù):這種技術(shù)對(duì)于顯示網(wǎng)狀纖維被認(rèn)為是十分可靠和廣泛使用的方法,它不但能夠區(qū)別網(wǎng)狀纖維和膠原纖維,而且可顯示纖細(xì)的網(wǎng)狀纖維。 嗜銀反應(yīng)(Argyrophil reaction)嗜銀細(xì)胞與親銀細(xì)胞所不同的是需要一種附加的還原劑來還原,它們比親銀細(xì)胞數(shù)量多。必須注意:親銀反應(yīng)中將找不到任何的嗜銀細(xì)胞。 親銀反應(yīng)(Argentaffin reation)親銀細(xì)胞有能力,直接地,不靠外加試劑,將銀液中的銀還原為一種不溶性的黑色金屬銀沉淀的細(xì)胞稱為親銀細(xì)胞。(Cells that have the ability to directl

y reduce silver solution producing an insoluble black metallic silver precipitate are termed-angentaffin cells)。⑷網(wǎng)狀纖維的顯示方法 ①Gomori’s法 ②Godon and sweet’s法 ③Wilder’s法 ④Foot’s法 1、Gomori’s法 ⑴試劑的配制。取10%硝酸銀3份,加入10%的氫氧化鉀1份,混合后產(chǎn)生大量的黑色沉淀物,倒去表面的液體,保留下沉淀物,加入10-20倍或更多的蒸餾水進(jìn)行沖洗,連續(xù)沖洗3次。待沉淀物清晰則可。用濃氨水逐滴加到溶液中。使沉淀物逐步溶解。待見沉淀物剩少數(shù)幾顆時(shí),再取10%的硝酸銀液加入數(shù)滴,至溶液再現(xiàn)渾濁為止。再用氨水將其溶解,然后稀釋10-15倍。即可使用。平時(shí)保存于4℃冰箱中。 ⑵操作步驟: ①切片脫蠟至水,蒸餾水洗, ②用0.5%高錳酸鉀氧化5min, ③自來水洗,繼用蒸餾水洗, ④用2%草酸漂白切片2min, ⑤自來水洗,蒸餾水洗, ⑥2%硫酸鐵銨媒染5min, ⑦水洗,蒸餾水洗, ⑧滴入氨性銀溶液浸染3-5min, ⑨蒸餾水洗數(shù)次, ⑩10%甲醛液還原5-10min,

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