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各種組織特殊染色法—彈性纖維染色

來(lái)源:印染在線 發(fā)布時(shí)間:2008年09月01日

各種組織特殊染色法—彈性纖維染色

彈性纖維主要由彈性蛋白(一種黃色硬蛋白,它是黃色彈性纖維組織的主要成分,干燥時(shí)易脆,而濕潤(rùn)時(shí)呈彎曲并富彈性)構(gòu)成。它廣泛分布于全身的各個(gè)部位,尤以循環(huán)系統(tǒng),呼吸系統(tǒng)和皮膚系統(tǒng)為甚。新鮮時(shí)它呈黃色,固又稱為黃色纖維。彈性纖維較細(xì),直徑0.2-1.0um,有分支,不成束。但可交織成網(wǎng)。它富有彈性,容易拉長(zhǎng),但不能拉到超過(guò)它的極限,外力除去后又恢復(fù)原狀。彈性纖維與膠原纖維交織在一起,在HE染色的標(biāo)本上,含量少時(shí)不易與膠原纖維區(qū)別,含量多時(shí)呈折光性強(qiáng)的淡粉紅色。由彈性蛋白構(gòu)成彈性纖維的鞘,并非完全的密封,在其周?chē)性S多微細(xì)孔,這些微細(xì)孔可作為營(yíng)養(yǎng)物及排除廢物的場(chǎng)所。 彈性纖維主要來(lái)源于帶有平滑肌特征的間胚葉細(xì)胞,少量可由脈管的內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生,先形成前——彈性蛋白(pro-elastin),這時(shí)在電鏡下可見(jiàn)到直徑為200nm的電子密度微纖維,在成熟的彈性纖維蛋白,電密度減少或喪失,較為均勻一致。 彈性纖維與膠原纖維,網(wǎng)狀纖維不同,它極難容于有機(jī)或無(wú)機(jī)的溶液里。 (一)彈性纖維的變形和病理變化 隨著年齡的增長(zhǎng),特別是到了老年的時(shí)候,彈性纖維可發(fā)生生理性的變化,這時(shí)可觀察到彈性纖維的縱行分裂,斷成碎片,最后成為顆粒,這些變化同時(shí)也伴有化學(xué)變化,氨基酸和鈣的含量有所增加,這些變化在皮膚是最明顯的。當(dāng)有病變的時(shí)候,我們便可在切片觀察到有的彈性纖維增生,有的被破壞,斷裂、崩解,失去彈性。如主動(dòng)脈瘤,就可見(jiàn)到瘤壁上的彈性纖維已經(jīng)失去了彈性。這是由于主動(dòng)脈壁的彈性纖維受到內(nèi)壓的不斷沖擊,彈性纖維過(guò)度牽拉,超過(guò)它的極期,再也恢復(fù)不了原狀,因此在切片標(biāo)本上(特殊染色)只能見(jiàn)到其痕跡或反應(yīng)物。 (二)彈性纖維的染色方法 1.Weigert氏雷鎖辛品紅法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method)試劑的

配制: Wergert氏雷鎖辛品紅液: 堿性品紅 2g 雷鎖辛 4g 蒸餾水 200ml 30%三氯化鐵 25ml 取500ml的燒瓶加入蒸餾水和雷鎖辛,用玻棒攪拌均勻,加熱直至沸騰,持續(xù)1-2min,再加入30%的三氯化鐵水溶液繼續(xù)攪拌直至煮沸2-3min后,此時(shí)溶液的顏色變?yōu)樽狭_藍(lán)色,冷卻后過(guò)濾。倒去濾液,將濾紙和沉淀物一起放入烤箱中一起烤干。取200ml95%酒精,將濾紙與沉淀物一起放入加熱溶解,除去濾紙,冷卻后過(guò)濾,用95%酒精湊足200ml,再加入4mlHCL。即可使用,保存于4℃冰箱,可長(zhǎng)期使用。 操作方法: ⑴切片脫蠟至水, ⑵0.5%高錳酸鉀水溶液氧化5min, ⑶水洗, ⑷2%草酸漂白1-2min, ⑸水洗, ⑹入95%酒精, ⑺入Weigert氏雷鎖辛液,室溫染1-2h, ⑻95%酒精分化至背景清晰為止, ⑼Van Giesson氏液或核固紅作對(duì)比染色, ⑽脫水透明,封固。結(jié)果:彈性纖維:深藍(lán)或深黑色,其余成分視用何種對(duì)比染色而定。 該法特點(diǎn): ①可將微細(xì)彈性纖維顯示出來(lái)。 ②方法可靠,顏色鮮紅色,切片可保存。 ③配制好的染液可使用較長(zhǎng)時(shí)間。

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